ICS 65.020.40 B 61 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 2408—2017 金线莲无性繁育技术规程 2017 - 09 - 19 发布 四川省质量技术监督局 2017 - 10 - 01 实施 发 布 DB51/T 2408—2017 目 次 前 言 ............................................................................... II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 繁殖材料来源 ...................................................................... 2 5 繁育技术 .......................................................................... 2 6 栽培技术 .......................................................................... 3 7 病虫害防治 ........................................................................ 5 8 苗木采收与加工 .................................................................... 5 附录 A（资料性附录） 金线莲组培快繁培养基配方 ........................................ 7 附录 B（资料性附录） 金线莲主要虫害综合防治 .......................................... 8 附录 C（资料性附录） 金线莲主要病害综合防治 .......................................... 9 I DB51/T 2408—2017 前 言 本标准按 GB/T 1.1－2009《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写规则》的规定编写。 本标准由四川省林业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准主要起草单位：四川省林业科学研究院。 本标准主要起草人：刘均利、陈善波、刘海鹰、罗慧、武华卫、吴宗兴、杨晓蓉、张晓成、刘青、 吴斌、白斌、梁颇、吴泞孜、杨柳璐、王莎。 II DB51/T 2408—2017 金线莲无性繁育技术规程 1 范围 本标准规定了四川地区金线莲种苗繁育的主要技术指标和要求，包括术语和定语、组培快繁技术、 大棚及林下栽培技术、采收与加工等方面的原则。 本标准适用于四川省的金线莲种苗繁育、大棚和林下栽培、采收及初加工项目。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 4285 农药安全使用标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB 15618 土壤环境质量标准 GB 19489 实验室生物安全通用要求 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 22278 良好实验室规范原则 NY/T 393 绿色食品农药使用准则 NY/T 394 绿色食品肥料使用准则 3 术语和定义 3.1 金线莲 Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. 金线莲为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）多年陆生单子叶植物，别称金线兰、金草、 鸟人参、少年红、金线虎头蕉，广泛分布于我国福建、广东、广西、海南、四川、贵州、云南等地。具 有凉血祛风、除湿解毒、止痛镇咳等功效。 3.2 外植体 Explants 植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段，在继代培养时，将培养的组织切段移入新 的培养基时，这种切段也称外植体。 3.3 污染 Contamination 培养基或培养材料生长有真菌或细菌等微生物的现象。 1 DB51/T 2408—2017 3.4 光培养 Light culture 有光照的培养。 3.5 暗培养 Dark culture 全天无光照的培养。 3.6 增殖培养 Proliferation culture 离体芽苗、愈伤组织或悬浮培养细胞不断倍增的培养过程。 3.7 生根培养 Rooting culture 诱导无根离体芽苗产生根的培养过程。 3.8 瓶苗 Tube seedling 通过植物组织培养产生的离体小植株。 3.9 瓶苗炼苗 Acclimatization 将组培苗连培养容器一起移至室外近自然环境中培养，提高苗木的木质化程度，增强苗木对自然光 照和温差变化适应能力的过程。 3.10 移栽 Outplanting 将组培苗种植到苗圃，并使苗木逐渐适宜自然条件的过程。 3.11 基质 Substrate 种植中用来固定植株及贮存植物所需水分、养分的材料。 4 繁殖材料来源 选生长健壮无病虫害的植株为外植体。 5 繁育技术 金线莲种子高度败育，种子繁殖难度过大，组培快繁技术是目前唯一最有效的金线莲优良种质资源 繁育技术手段。 5.1 2 外植体的采集、消毒与接种 DB51/T 2408—2017 5.1.1 外植体的采集与处理 连续2个以上的晴天午后进行采集，当天采集当天消毒接种。需长途运输时应使用保湿材料包扎， 置入保温桶内加冰袋降温保鲜处理，或使用车载冰箱储藏保鲜。 5.1.2 外植体消毒 外植体用洗洁剂溶剂（如洗衣粉等）洗净，流水冲洗30min。在超净工作台上，将植株切分成1cm 左右带芽茎段，先用75%乙醇消毒20s，再用0.1%HgCl2加3滴～4滴0.08%～0.12%的吐温-80或吐温-20消 毒液浸没5 min～7 min（其间轻轻震摇），用无菌水清洗3次～5次，备用。 5.1.3 外植体接种 将消毒后的外植体切割为带1个顶芽或腋芽的枝段，切割好后平放在附录A所示诱导培养基上。外 植体接种后暗培养7d～10d再转入光培养。培养温度20℃～25℃。 5.2 增殖培养 初代诱导培养基上培养2个月后，转接至附录A所示增殖培养基上进行增殖扩繁。 5.3 生根培养 增殖培养基上培养4个月，苗木高度达到4cm时，转接到附录A所示生根培养基上进行生根培养。培 养2个月后进行炼苗。 5.4 一步成苗培养 初代诱导培养基上培养2个月后，转接至附录A所示一步成苗培养基上培养，5个月后苗木高度达到 5cm时，进行炼苗。 5.5 培养条件 培养室温度20℃～25℃，光照强度2000lx，光照时间10h/d～12h/d。 5.6 炼苗 瓶苗炼苗时置于不淋雨的棚内进行，棚内配遮阴网，随炼苗时间增加逐步提高光照。炼苗环境温度 10℃～30℃。炼苗时间2周～4周，冬季长，夏季短。 5.7 洗苗及包装运输 用清水将瓶苗上的培养基洗净，放入泡沫箱中，外加胶带密封。之后置于阴凉处，避免暴晒。 运输时间不超过2d，环境温度控制在10℃～30℃之间，运输途中严禁倒置翻转。运至目的地后，尽 快种植。若种植时间超过3d，应将苗木全部直立放置，每日喷雾补水，全程注意遮阴。 6 栽培技术 6.1 栽培场地 6.1.1 大棚栽植 大棚顶部和侧面均需配备遮光率80%的遮阴网。 3 DB51/T 2408—2017 6.1.2 林下栽植 根据林地坡向进行作畦，畦面宽100cm～120cm，高出地面10cm～15cm，长度依地形而定，畦沟和 围沟宽20cm～25cm，深10cm～15cm，使沟相通。 6.2 栽植环境 对栽植地的选择要符合GB3095环境空气质量标准、GB5084农田灌溉水环境质量标准、GB15618土 壤环境质量标准。 6.3 栽植时间 每年3月～5月。 6.4 栽植方式 6.4.1 大棚栽植 用容器栽植，选用平盘或筛盘，筛盘上覆无纺布，栽植株行距5cm×5cm或5cm×8cm。 6.4.2 林下栽植 林下利用原土（腐殖土）栽植，栽植株行距8cm×10cm。栽植深度2cm左右， 2条～3条气生根植入 土中。 6.5 基质准备 6.5.1 基质选择与处理 基质选用树皮、草炭土、腐殖土，配以少量珍珠岩。树皮需粉碎成0.5cm～1.0cm。所有基质经充分 腐熟后使用。 6.5.2 基质配制 容器栽植两种基质配方可选：①树皮：草炭土/腐殖土：珍珠岩=6：3：1；②树皮/草炭土/腐殖土： 珍珠岩=10：1。 林下种植直接利用林下腐殖土，整地疏松后使用。 6.5.3 基质消毒 移栽前1d～2d，将育苗基质用0.3%高锰酸钾溶液淋透消毒。 6.6 栽植温度及光照 栽植温度16℃～28℃，光照强度2500lx～4000lx。 6.7 苗木处理 将组培苗用0.1%百菌清或其它灭菌剂溶液进行消毒处理后移入育苗基质。 6.8 栽植苗光湿温的管理 移栽完成后，浇透定根水，盖上塑料薄膜和遮阴网，温度20℃～30℃，空气相对湿度85％左右。移 植苗根系发育完好生长稳定后逐步揭除塑料薄膜和遮荫黑网。 6.9 6.9.1 4 后期管理 水分 DB51/T 2408—2017 浇水以维持基质湿润为原则，夏季浇水避开中午。 6.9.2 施肥 幼苗移植10d后，施稀释至1500倍～2000倍的叶面肥。在基质养分能够满足苗木生长的情况下，少 施或不施肥。 6.9.3 除草 及时拔除杂草，保持苗床的清洁。 6.9.4 动物危害 表1 6.9.5 动物危害及防治方法 动物类型 防治方法 大型动物 在种植地四周搭设铁网围挡 小型动物 通过放置诱饵的方法进行预防 鸟类 在苗木上部加设网子 露地保护 野外栽植的苗木，越冬需加设薄膜或稻草覆盖以保温。 7 病虫害防治 严格执行“