ICS 11. 020 WS C 50 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 421—2013 抗酵母样真菌药物敏感性试验 肉汤稀释法 Antifungal susceptibility testing of yeasts-Broth dilution method 2013-07-16 2013-12-01 实施 发布 发布 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 WS/T4212013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准起草单位：卫生部临床检验中心、北京大学第医院、北京大学人民医院、首都医科大学附属 北京友谊医院、中国医学科学院北京协和医院、卫生部北京医院、华中科技大学同济医学院附属同济 医院。 本标准主要起草人：胡继红、李若瑜、张楠、王辉、苏建荣、徐英春、胡云建、孙自铺。 WS/T 421—2013 抗酵母样真菌药物敏感性试验 肉汤稀释法 1范围 本标准规定了用经典的宏量肉汤稀释方法(Broth Macrodilution method)检测抗酵母样真菌的最 小抑菌浓度（Minimal Inhibitory Concentration，MIC)的参考方法，并推荐了与本参考方法的结果具有 良好一致性的微量肉汤稀释方法(Broth Microdilution method)。 本标准适用于酵母及酵母样真菌（引起的深部真菌感染）的药物敏感性试验，包括念珠菌属 Candida spp.（含光滑念珠菌C.glabrata)和新生隐球菌Cryptococcus neoformens。不适用双相真菌， 如皮炎芽生菌Blastom yces dermatitidis 荚膜组织胞浆菌Histoplasma capsulatum 荚膜亚种。 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 抗真菌药物 antifungal agents 用于人体内对真菌具有抑制生长或杀灭作用的生物物质、半合成或合成物质，不包括消毒剂、灭菌 剂和防腐剂。 2. 2 最小抑菌浓度minimal inhibitory concentration; MIC 在琼脂或肉汤稀释法中，抗菌药物能抑制微生物生长的最低浓度。 2. 3 折点 breakpoint 临床上能将真菌分为敏感、中介、耐药的特定MIC值。 折点系综合体外MIC值、PK/PD数据、临床疗效而得出，还可随环境改变而变化（如感染部位、常 规药物剂量的改变、使用途径及次数的改变）。 2. 4 敏感susceptible;S 此浓度在体外检测中能抑制真菌生长，当使用推荐剂量时在临床治疗中很有可能取得成功。 2.5 中介 intermediate;I 菌株对常规用药时体液和组织中能达到的药物浓度反应率低于敏感株，和（或)不能被清楚地划分为 “敏感”或“耐药”。在体外真菌可被抑制生长，此浓度临床治疗效果不肯定。如为药物聚集部位或高剂量 使用，则临床治疗有效。该范围可作为一缓冲区，避免由于微小、不可控的技术因素导致严重解释偏差 2. 6 耐药 resistant;R 当使用推荐剂量时在临床治疗中很有可能失败。 2.7 剂量依赖性敏感 susceptible-dose dependent;S-DD 当使用比常规用药更高剂量或更高血药浓度时能够取得疗效。 WS/T 421--2013 2.8 非敏感 non-susceptible;NS 当前仅有敏感解释，但无中介或耐药解释类型的微生物，多用于仍未遇到耐药菌株的新抗菌药物。 2.9 效价 potency 抗菌药物中具有抗菌活性的部分，通过同类标准物质测定得出。单位表示为mg/g、IU/g，或用百 分比表示。 2.10 质量控制quality control;QC 为保证检测的准确性和可重复性而采取的方法或技术。 3抗真菌药物 3.1抗真菌药物标准品或参考品 抗真菌药物标准品或参考品可从药物生产厂家直接购买得到。使用有效期内的标准品，在厂家推 荐的条件下贮存。当从低温下取出药物时，需恢复到室温后再开瓶。药物称量按照配制贮存液的浓度 计算，浓度为检测时使用浓度的100倍。称量应在分析天平上进行，天平应定期校准。 3.2称量药物 计算药物质量及稀释液体积见式（1）、式（2）： A.d=u (1) V-m.r .(2) 式中 m药物的质量，单位为毫克（mg）： β药物的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL) 药物的效价，单位为微克每毫克(μg/ mg); V药物的体积，单位为毫升(mL)。 3.3药物储存液（母液） 3.3.1溶剂 溶解时，一些药物需使用非水溶剂溶解（见表1）。溶剂的信息可参考厂家说明书。溶剂包括（分析 级别）：二甲基亚砜（DMSO）乙醇、聚乙二醇、羧甲基纤维素。 表1抗真菌药物储存液使用的溶剂、稀释液和检测范围 抗真菌药物 溶剂 检测范围 稀释液 μg/ml. 两性震素B DMS(O) 培养基 0. 031 2~~16 氟康唑 水 培养基 0. 125~~64 伊曲康唑 DMSO 培养基 0, 015 6~8 2