(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210852496.X (22)申请日 2022.07.19 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 (72)发明人 徐恩波　刘东红　朱益源　牛瑞浩　 周建伟　王文骏　丁甜　 (74)专利代理 机构 杭州君锐知产专利代理事务 所(普通合伙) 33443 专利代理师 黄欢娣 (51)Int.Cl. A23L 13/40(2016.01) A23L 5/47(2016.01) A23L 13/10(2016.01) A23L 17/10(2016.01)G06T 5/00(2006.01) G06T 17/00(2006.01) (54)发明名称 软组织的染色方法及人造肉模型生成方法 (57)摘要 本发明公开了一种软 组织的染色方法， 该方 法为： 将软 组织浸泡于碘 ‑碘化钾染色液中， 浸泡 时间在5‑14天。 用这种染色液对肉品样品进行 染 色， 在micro ‑CT扫描中获得良好的组织对比度， 为研究肉类的三维结构及可视化提供了参考， 克 服了当前食品3D打印数字模型单一， 打印产品不 具有真实物体结构的问题， 为食品3D打印数字模 型构建提供了新思路， 有助于生产具有咀嚼感和 多汁口感的人造肉产品。 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 CN 115363176 A 2022.11.22 CN 115363176 A 1.软组织的染色方法， 其特征在于， 将软组织浸泡于染色液中， 所述染色液为3～5wt％ 的碘‑碘化钾溶液， 浸泡时间在5 ‑14天。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述染色液是按照如下方法配制的： 将碘 化钾以1g/ ml的浓度溶解于蒸馏水中， 加入碘化钾一半质量的碘搅拌使碘完全溶解， 加水稀 释至所需浓度后， 即可 得到所需染色液。 3.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述染色液的体积V取决于软组织的pH与 肌肉含量， 满足V＝254*m*[10k ‑(7.2‑pH)]， 其中k为预先测定的软组织中的蛋 白质含量， m 为软组织质量， 单位 为kg， pH为软组织的pH， V单位 为ml。 4.一种人造肉模型生成方法， 其特征在于， 采用权利要求1所述方法对软组织进行染 色， 然后通过micro ‑CT扫描获取真实肉品二维切片图像， 从而生成三维模型。 5.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 还包括根据所述三维模型， 通过3D打印获 得实体模型。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115363176 A 2软组织的染色方 法及人造肉模型生成方 法 技术领域 [0001]本发明属于食品加工领域， 特别涉及一种软组织的染色方法及 基于micro ‑CT的人 造肉结构可视化模型生成方法， 该 方法可应用于食品模型的3D打印。 技术背景 [0002]由于世界人口的持续增长， 全球肉类消费总量一再攀升， 畜牧业被证实是大气中 甲烷的最主要来源， 严重加剧了温室效应， 并且过量食用红肉会增加患有结肠直肠癌的风 险。 同时， 由于海水污染不断加剧、 海洋资源掠夺性开 发严重， 海洋鱼类生存环 境急剧恶化。 这些原因共同促进了人造肉食品制 造技术的兴起。 然而， 大多数 的公司或实验室的生产技 术重在模仿肉类产品的色泽、 风味以及整体质构， 却忽略了肉制品肌肉复杂的多级层次结 构， 导致产品缺少肉制品独有的咀嚼性、 多汁 性和纤维口感。 [0003]目前， 3D打印作为一种通过层层堆积生产食物的新兴技术， 为细胞培养支架和植 物基的肉产品类似物 生产提供了一种可行的方法， 但目前大部 分的研究多聚焦于打印材料 的开发与优化， 所使用的3D打印模型大多是简单的几何模型， 并不具有真实肉制品的微观 肌肉结构。 由于肉制品的口感质构与其内部组织结构关系密切， 还原其微观层次结构并进 行3D打印将有助于构建在口感和结构上 更加真实的人造肉产品。 [0004]Micro‑CT采用锥 形X射线， 分辨率可达百纳米级， 可以更好地还原肉制品肌肉的层 次结构， 结合3D打印技术使 得制造具有真实结构的人造肉产品成为可能。 但是肌肉、 结缔 组 织等软组织对X射线的反应度较低， 对比区分度不明显， 并且micr o‑CT扫描的二维切片图像 无法直接进行应用于 3D打印。 发明内容 [0005]为了解决这一问题， 本发明提出了一种软组织的染色方法， 该方法为： 将软组织 (真实肉品)浸泡于染色液中， 所述染色液为3～5wt％的碘 ‑碘化钾溶液。 相较于磷钨酸、 四 氧化锇等对比增强剂， 本发明使用的碘制剂毒性低、 组织渗透能力强、 对肌肉亲和性高。 本 发明将浸泡时间控制在5 ‑14天， 染色时间过短， 将导致样品对比度弱， 无法精确区分组织， 而染色时间过长会导 致组织严重缩水， 样品微观结构被破坏。 [0006]进一步地， 本发明提供了上述染色液的配制方法： 所述染色液是按照如下方法配 制的： 将碘化钾以1g/ ml的浓度溶解于少量蒸馏水中， 加入碘化钾一半质量的碘搅拌使碘完 全溶解， 继续加入5 ‑10倍的蒸馏水， 即可得到所需染色液。 该配制方法不仅能保证有效的碘 的浓度， 还能避免引入干扰性 强的显色试剂， 保证肉品等软 组织纤维、 胶质等细节的原始形 貌与结构。 [0007]进一步地， 所述染色液的体积V取决于软组织的pH与肌肉含量， 满足V＝254*m* [100k‑(7.2‑pH)]， 其中k为预先测定的肉品中的肌肉含量， m为样品质量， pH为样品的pH。 通 过染色液的定量控制， 能够 有效的还原1 ‑100 μm尺度的肌肉组织空间结构， 最小尺度可达百 纳米级别。说　明　书 1/5 页 3 CN 115363176 A 3