ICS 65.020.20 B 05 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 2283—2015 大花萱草工厂化育苗生产技术规程 2015 - 12 - 25 发布 河北省质量技术监督局 2016 - 02 - 01 实施 发 布 DB13/T 2283—2015 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河北省林业厅提出。 本标准起草单位：河北省林业科学研究院。 本标准主要起草人：赵玉芬、储博彦、尹新彦、李金霞、刘满光、郝建清、张永信、徐晓娜、张军 霞、李国松、王乃泽。 I DB13/T 2283—2015 删除的内容: 培养车间与育苗区的设 计 带格式的 大花萱草工厂化育苗生产技术规程 ... [1] 批注 [A1]: 这个词过大，包含了前面 ... [5] 删除的内容: 设计要求 1 范围 ... [2] 带格式的 本标准规定了大花萱草工厂化育苗生产的组培工厂的设计要求、所需的仪器设备及化学试剂、生产 工艺流程、生根与移栽管理、质量分级及包装、标志、运输等内容。 本标准适用于大花萱草工厂化育苗生产。 ... [3] 删除的内容: 清晰 删除的内容: 清新的地点。 ... [4] 批注 [A2]: 此处依然是应该包括表格 ... [6] 批注 [A3]: 没有单位 2 规范性引用文件 批注 [A4]: 这些也没有单位 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 LY/T 2063-2012 萱草种苗生产技术规程 NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 批注 [A5]: 这些也没有单位，下同 删除的内容: 大花萱草品种选择与母 ... [7] 带格式的: 字体颜色: 自动设置 删除的内容: .1 3 组培工厂的设计要求、所需的设备、器材及试剂 批注 [A6]: 品种名应加单引号 删除的内容: 大花萱草如红运、莎曼、 ... [8] 带格式的 ... [9] 按照 NY/T 2306-2013中4.1～4.2执行。 带格式的 ... [10] 删除的内容: 材料管理 4 瓶苗生产工艺流程 4.1 品种选择 带格式的 ... [11] 带格式的 ... [12] 删除的内容: 大花萱草组培的 选择市场流行的品种，见附录A。 4.2 母株资源保存 带格式的 ... [13] 带格式的 ... [14] 删除的内容: .1 将大花萱草母株种植在特定区域，加强肥水管理，确保植株健壮，防治病虫害，减少植株表面附带 的微生物和害虫。 4.3 培养基选择与母液配制 带格式的 ... [15] 带格式的 ... [16] 带格式的 ... [17] 删除的内容: 材料生长发育阶段 4.3.1 培养基选择 删除的内容: .2 根据大花萱草不同品种和外植体部位选择合适的培养基种类和激素配比。以MS和1/2 MS(大量元素 减半)为基本培养基。参见附录B。 4.3.2 基本培养基母液配制和保存 带格式的 ... [18] 带格式的 ... [19] 带格式的 ... [20] 带格式的 ... [21] 删除的内容: 7.2 按照 NY/T 2306-2013附录G执行。 4.3.3 植物生长调节剂的母液配制和保存 1 带格式的 ... [22] 带格式的 ... [23] 删除的内容: ... [24] 带格式的 ... [25] 带格式的 ... [26] 删除的内容: <#> DB13/T 2283—2015 （2）植物生长物 ... [27] 删除的内容: 大花萱草组培的 按照 NY/T 2306-2013附录H执行。 带格式的 ... [28] 带格式的 ... [30] 删除的内容: 8.1 4.4 培养容器和接种器械的清洗 按照 NY/T 2306-2013中6.1和6.2 执行。 带格式的 ... [29] 带格式的 ... [31] 删除的内容: g 4.5 培养基制作 带格式的 4.5.1 配制 ... [32] 删除的内容: . 根据培养基成分准备好蒸馏水、琼脂、蔗糖和各类母液等。制作1L培养基加蒸馏水700mL（按所 -1 -1 -1 需容量的70%左右），再加入琼脂4g·L ～6 g·L ，加热搅拌使琼脂融化。加砂糖30g·L ， 糖溶解 后，根据预配母液取量，再根据要求加入激素若干，并充分搅拌均匀后，加蒸馏水定容至1L。用pH计或 -1 -1 pH试纸测pH值，用0.1mol·L 的HCl或0.1 mol·L 的NaOH调节pH至为5.8～6.0。生产中根据所需容量按 比例配置。 4.5.2 分装 带格式的: 字体颜色: 自动设置, 上标 删除的内容: l…加热搅拌使琼脂融化。 ... [33] 删除的内容: .2 带格式的 ... [34] 带格式的 ... [35] 删除的内容: .3 根据不同需要定量分装，如150mL的培养瓶，每瓶分装约30mL～40mL。分装培养基时勿将培养基沾 在培养瓶瓶口。 带格式的 ... [36] 带格式的 ... [37] 删除的内容: 4.5.3 高压灭菌 （1） 带格式的 -2 ... [38] -2 培养基分装后应在10h内进行湿热灭菌；灭菌条件一般在1.1kg·cm ～1.2kg·cm 、121℃下，灭菌 18min～20min。 4.5.4 贮存 灭菌后的培养基应注明培养基编号及配制日期，储存于培养基储藏室内，存储时间不应超过10d。 4.6 接种操作 按照NY/T 2306-2013中10.1～10.11执行。 4.7 培养室操作 删除的内容: 在对培养基进行高压灭菌 ... [39] 带格式的 ... [40] 2 4.8 外植体选择、灭菌及接种 4.8.1 外植体的选择 -2 删除的内容: .3 带格式的: 字体颜色: 自动设置 删除的内容: <#>9 选取外植体 ... [42] 带格式的 ... [43] 带格式的 ... [45] 带格式的 按照NY/T 2306-2013中11.1～11.5执行。 -2 删除的内容: /…cm …m ～1.2kg·cm ... [41] ... [44] 删除的内容: 准备 删除的内容: 消毒剂的配制和安全使用： ... [46] 带格式的 ... [47] 带格式的 ... [48] 从健康植株上选取1.5cm～2.5cm花蕾做外植体最好。也可采用大花萱草的茎芽、幼嫩花序轴上带节 点区段为外植体。 批注 [A7]: 图1 4.8.2 外植体消毒 删除的内容: <#>10.2 接种人员应在 ... [49] 带格式的 ... [50] 将整理好的外植体，用餐具洗涤剂溶液浸泡并振荡5min～10min，然后自来水冲洗30min。在超净台 上将预处理后的外植体放在有盖容器中，倒入75%酒精溶液中浸泡10s～30s，用无菌水冲洗外植体3次。 再用0.1%的HgCl2溶液浸泡8min～10min，或者5%次氯酸钠溶液浸泡20min～30min，用无菌水冲洗3～5次 后备用。升汞安全管理方法按照《危险化学品安全管理条例》执行。 2 这些应该都是接种操 ... [52] 带格式的 ... [51] 带格式的 ... [53] 删除的内容: .2 带格式的 ... [54] 带格式的 ... [55] 带格式的 ... [56] 删除的内容: 将大花萱草的花蕾和茎芽 ... [57] 带格式的: 字体颜色: 自动设置 删除的内容: .3 带格式的 ... [58] 删除的内容: <#>12 外植体接种操 ... [59] 带格式的 ... [60] 带格式的 DB13/T 2283—2015 ... [61] 批注 [A8]: 为什么不另起一行？如上 ... [63] 删除的内容: 带格式的: 段, 行距: 单倍行距 4.8.3 外植体接种 在超净工作台上用手术刀和镊子将外植体切割成所需大小，一般切去花蕾顶部，留花托近1.0cm左 右，纵切为2块；茎芽1.0cm～1.5cm，幼嫩花序轴上带节点区段取0.5cm～1.0cm。接种到初代培养基上。 每瓶接种1个外植体。 将品种代号、培养基类型、接种人员以及接种日期认真标示到瓶上；放入培养室 进行培养。 删除的内容: 从高温电热灭菌器中取 ... [62] 删除的内容: 将大花萱草的花蕾和茎 ... [64] 批注 [A9]: ... [66] 带格式的 ... [65] 4.9 初代培养 删除的内容: 个人编号 培养温度为23℃±2℃，，光照强度1000 lux～1500 lux，每日光照12h～14h。外植体在初代培养 基 培养1周后，花托基部开始膨大。培养3周后，形成淡黄或浅绿光滑的愈伤组织。 批注 [A10]: 建议相同级别的题目统 ... [71] 4.10 继代培养 删除的内容: 组培 4.10.1 不定芽分化 带格式的 ... [68] 带格式的 ... [69] 带格式的 ... [70] 带格式的 ... [72] 将愈伤组织转接到继代培养基上，诱导不定芽分化，培养条件同4.9。 4.10.2 不定芽增殖与继代 删除的内容: <#>12.4 关机 ... [67] 删除的内容: 培养温度为23 当瓶苗增加到一定数量和规模后，降低分裂激素的浓度，进行丛生芽分化培养 ，可采用丛生芽— 切割—小芽团—大芽团—丛生芽循环增殖的方式。150mL的培养瓶接种数量为5块/瓶，要排放均匀、整 齐。每3周继代1次，增殖系数宜控制在3～5。 带格式的 ... [73] 删除的内容: 小时…～14h。外植体在 ... [74] 删除的内容: 大花萱草 4.11 生根培养 当芽丛生长到3cm～4cm左右即可进行生根培养。 将丛生芽切割单株接种于生根培养基中，在150mL 的培养瓶接种数量为10株/瓶。培养15d～20d后，当幼苗基部长出3～5条新根，根长2cm～3cm长时，就 可进行炼苗移栽。 带格式的 ... [75] 带格式的 ... [76] 删除的内容: 不定芽 带格式的 ... [77] 带格式的 ... [78] 5 瓶苗质量要求 删除的内容: 基 5.1 整体感 删除的内容: 诱导不定芽分化的培养 ... [79] 删除的内容