(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111393663.0 (22)申请日 2021.11.23 (71)申请人 辽宁中医药大学 地址 110847 辽宁省沈阳市皇姑区崇山 东 路79号 (72)发明人 英哲铭　杨关林　贾连群　英锡相　 郭胜男　 (74)专利代理 机构 沈阳亚泰专利商标代理有限 公司 21107 代理人 史力伏 (51)Int.Cl. C07D 217/14(2006.01) C07D 217/02(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A23L 33/105(2016.01) (54)发明名称 马齿苋中两种四氢异喹啉的提取分离方法 及其应用 (57)摘要 本发明涉及中药提取、 分离领域， 尤其涉及 从马齿苋中提取、 分离和鉴别出的两种新化合物 及其提取分离方法。 所述的新化合物， 分子式为 C17H25NO4和C14H21NO2， 分别命名为8 ‑(6,7‑ dihydroxy ‑1,2,3,4‑tetrahydroisoquinolin ‑ 1‑yl)octanoic  acid （1） 和1‑pentyl‑1,2,3,4‑ tetrahydroisoquinoline ‑6,7‑diol （2） 。 还提供 上述新化合物的提取分离方法， 依次采用50%乙 醇回流提取、 硅胶柱层析、 聚酰胺柱层析、 ODS中 压柱、 键合硅胶柱、 Sephadex  LH‑20纯化以及 UHPLC分离制备。 其结构采用紫外、 红外、 质谱、 氢 谱、 碳谱及二维核磁波谱解析的方法确定为两种 新的四氢异喹啉类化合物。 此两种化合物具有抗 炎、 抗肿瘤作用， 本发明新化合物及其盐或衍生 物可以作为其他化合物合 成先导物， 以及新药开 发和药理活性研究的原料， 用于制备抗炎、 抗肿 瘤的药物或保健品。 权利要求书2页 说明书8页 附图8页 CN 113968817 A 2022.01.25 CN 113968817 A 1.从马齿苋药材中分离出的两种四氢异喹啉化合物， 其特征在于， 分子式分别为 C17H25NO4和C14H21NO2， 分别命名为8 ‑(6,7‑dihydroxy‑1,2,3,4‑tetrahydr oisoquinolin ‑1‑ yl)octanoic  acid （1） 和1 ‑pentyl‑1,2,3,4‑tetrahydroisoquinoline ‑6,7‑diol （2） ， 其化 学结构式如下∶ 。 2.如权利要求1所述的从马齿苋药材中分离出的两种四氢异喹啉化合物的提取分离方 法， 其特征在于， 具体步骤为： 步骤1： 取马齿苋干燥药材， 采用50%乙醇回流提取， 合并滤液直接加热浓缩， 放凉至室 温， 得药液备用； 步骤2： 将步骤1中浓缩液上硅胶柱， 用乙酸乙酯： 乙醇洗脱， 合并减压回收溶液至浸膏， 得到提取物； 步骤3： 将步骤2中乙酸乙酯提取物经聚酰胺柱分离， 采用水、 乙醇 ‑水洗脱， 将乙醇 ‑水 洗脱的显色部 分合并蒸干后上ODS柱， 用甲醇 ‑水梯度洗脱， 经薄层色谱检测， 显色， 将70%甲 醇部位部分合并， 减压浓 缩至干， 备用； 步骤4： 将步骤3中所得物再经预处理的键和硅胶柱层析分离， 用乙酸乙酯 ‑甲醇梯度洗 脱， 得到若干洗脱部位， 经薄层色谱进 行检测， 显 色， 将显色的洗脱部位减压浓缩至干， 得浓 缩物备用； 步骤5： 将步骤4中所得浓缩物经预处理的Sephadex  LH‑20， 以甲醇洗脱， 经薄层色谱进 行检测， 显色， 将显色的洗脱部位分别减压浓 缩至干， 得浓缩物备用； 步骤6： 对步骤5中所得浓缩物进行UHPLC分离制 备， 以甲醇 ‑0.1%甲酸作为流动相进行 等度洗脱， 制备 得到上述两种化 合物。 3.如权利 要求2所述提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤1中50%乙醇回流提取， 50%乙 醇用量为药材的8倍～16倍。 4.如权利要求2所述提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤2中所用体积比为5： 1、 4： 1、 3： 1和2： 1的乙酸乙酯/乙醇梯度洗脱； 硅胶目数10 0目～200目。 5.如权利要求2所述提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤3中所用乙醇和水的体积比 为50： 50、 70： 30和90： 10； 甲醇和水的体积比为5 0： 50、 70： 30和90： 10 。 6.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤3、 4和步骤5中ODS柱和 Sephadex  LH‑20的预处理过程为甲醇浸泡过24小时， 上柱， 用甲醇洗至滴入水中无混浊， 再 以初始流动相平衡。 7.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤4中所用乙酸乙酯和甲醇 的体积比为1： 0、 10： 1、 5： 1和0： 1； 填料 粒度为40µm。 8.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤5中所用甲醇洗脱程序为 等度洗脱。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113968817 A 29.如权利 要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤6中所用甲醇 ‑0.1%甲酸体 积比为50： 50， 两种化 合物保留时间分别为8.173mi n （1） 和8.323mi n （2） 。 10.如权利要求1所述的从马齿苋药材中分离出的两种四氢异喹啉化合物在制备抗炎、 抗肿瘤的药物或保健品中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113968817 A 3