(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111305763.3 (22)申请日 2021.11.05 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114044823 A (43)申请公布日 2022.02.15 (73)专利权人 深圳市人民医院 地址 518000 广东省深圳市罗湖区翠竹街 道东门北路1017号大院 (72)发明人 王继刚　李志杰　马静博　徐小龙　 戴凌云　陈昆　 (74)专利代理 机构 深圳市科吉华烽知识产权事 务所(普通 合伙) 44248 专利代理师 胡吉科 (51)Int.Cl. C07K 16/18(2006.01) C07K 19/00(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 5/10(2006.01)A61K 49/00(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) G01N 33/68(2006.01) G01N 33/574(2006.01) (56)对比文件 AU 20173 66739 A1,2019.0 6.06 CN 106188295 A,2010.04.20 CN 113999308 A,202 2.02.01 CN 112074534 A,2020.12.1 1 US 2010092978 A1,2010.04.15 Zijie Feng等.Potent sup pression of neuroendocri ne tumors and gastrointestinal cancers by CDH17CAR T cells without toxicity to n ormal tis sues. 《Nature Cancer》 .202 2,第3卷(第3期), Abstract. 审查员 银欢 (54)发明名称 靶向钙粘蛋白17的纳米抗体及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种靶向钙粘蛋白17的纳米 抗体及其应用， 所述靶向钙粘蛋白17的纳米抗体 的氨基酸序列的互补决定区为如SEQ  ID NO:2所 示的CDR1、 如SEQ  ID NO:4所示的CDR2、 如SEQ  ID  NO:6所示的CDR3； 或如SEQ  ID NO:9所示的CDR1、 如SEQ ID NO:11所示的CDR2、 如SEQ  ID NO:13所 示的CDR3。 本发明的靶向钙粘蛋白17的纳米抗 体， 与CDH17蛋白具有很好的结合活性， 与CDH17 蛋白的亲和 力均在纳摩尔水平， 具有较高的亲和 力， 对细胞膜表面的CDH17蛋白具有特异性识别 能力。 权利要求书1页 说明书6页 序列表5页 附图7页 CN 114044823 B 2022.07.05 CN 114044823 B 1.靶向钙粘蛋白17的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向钙粘蛋白17的纳米抗体的氨基 酸序列的互补决定区为如SEQ  ID NO:2所示的CDR1、 如SEQ  ID NO:4所示的CDR2、 如SEQ  ID  NO:6所示的CDR3； 或如SEQ ID NO:9所示的CDR1、 如SEQ  ID NO:11所示的CDR2、 如SEQ  ID NO:13所示的 CDR3。 2. 根据权利要求1所述的靶向钙粘蛋白17的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向钙粘蛋 白17的纳米抗体的氨基酸序列的框架区包括SEQ  ID NO:1所示的FR1、 如SEQ  ID NO:3所示 的FR2、 如SEQ  ID NO:5所示的FR3、 如SEQ  ID NO:7所示的FR4。 3. 根据权利要求2所述的靶向钙粘蛋白17的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向钙粘蛋 白17的纳米抗体的氨基酸序列如SEQ  ID NO:15所示。 4. 根据权利要求1所述的靶向钙粘蛋白17的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向钙粘蛋 白17的纳米抗体的氨 基酸序列的框架区包括SEQ  ID NO:8所示的FR1、 如SEQ  ID NO:10所示 的FR2、 如SEQ  ID NO:12所示的FR3、 如SEQ  ID NO:14所示的FR4。 5. 根据权利要求4所述的靶向钙粘蛋白17的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向钙粘蛋 白17的纳米抗体的氨基酸序列如SEQ  ID NO:16所示。 6.一种核酸， 其特征在于， 所述核酸为： 编码如权利要求1~5任意一项所述的靶向钙粘 蛋白17的纳米抗体的核酸或其互补序列。 7.一种表达载体， 其包 含如权利要求6所述的核酸。 8.一种宿主细胞， 其包 含如权利要求7 所述的表达载体。 9.权利要求1~5任意一项所述的靶向钙粘蛋白17的纳米抗体在制备靶向钙粘蛋白17的 检测试剂、 活体成像探针、 嵌合型免疫细胞或治疗性 抗体中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114044823 B 2靶向钙粘蛋白17的纳米抗体及其应用 技术领域 [0001]本发明属于免疫学或分子生物学技术领域， 尤其涉及靶向钙粘蛋白17的纳 米抗体 及其应用。 背景技术 [0002]随着对肿瘤基因组学、 蛋白组学、 癌细胞相关的增殖增生凋亡、 肿瘤血管生成等分 子机制及信号转导的深入认识， 消化系统各种癌症的一些关键 分子及信号通路也逐渐被揭 示。 多种能够针对这些关键 分子或信号通路的靶向治疗药物应运而生并在一定程度上延长 了患者的生存期。 对于消 化系统肿瘤治疗而言， 现如今已经在临床上广泛使用的靶向药物 有靶向VEGF的Avastin、 靶向EGFR的Erbitux  和 Vectibx以及靶向HER2的Herceptin等等。 除此之外， 还有多种靶向关键信号通路的小分子激酶的抑制剂， 如Tarceva、 Sorafenib、 Gleevec 以及 Stivarga  等。 但是， 上述靶向药物仅仅减少了极小部分消化系统肿瘤患者 的死亡率。 大量证据 表明， 绝大多 数病人并未从这些药物中获益， 有 些反而产生严重甚至致 命的副作用。 而起初有效的患者， 也会对上述靶向药物产生耐药， 从而丧 失对上述药物的反 应。 以 EGFR 抗体为例， 25~77%的大肠癌患者高表达  EGFR， 大部分病人最初都对  EGFR 抗 体产生较好的效应， 但随后由于耐药经历快速的疾病进展期； 而  HER2 在大肠癌的表达率 仅有2~6%， 因此 HER2 抗体仅仅能使极小部分大肠癌患者获益。 上述其他靶向药物在消化 系统不同肿瘤中都有相似的情况， 很多在临床实验阶段就以失败告终。 因此， 对于消化系统 肿瘤而言， 急需发现新的更好的分子靶标以及开发更有效的分子靶向治疗策略。 [0003]钙粘蛋白17 （Cadherin  17, CDH17） 也被称为肝肠钙粘蛋白 （Liver  intestine ‑ cadherin,  LI‑cadherin） ， 是一个具有独特结构和功能的钙 粘蛋白超家族中的一员。 CDH17 由七个钙粘蛋白重复序列构成细胞外段， 细胞内段则仅由2 4个氨基酸构成。 近年来， 全球不 同的研究机构已经证实， 在消化系统的肿瘤如胃癌、 大肠癌、 胰腺癌及部 分肝癌中， CDH17在 相当比例的上述癌症组织呈现高表达水平； 特别是腺癌中尤其明显。 而且高表达CD H17分子 的原发癌继发转移后， 转移灶中肿瘤组织依然保持高水平表达CDH17。 基于TCGA数据的分 析， 提示胃癌、 大肠癌、 胰腺癌以及部分肝癌组织中CDH17基因均呈现高于相应正常组织的 表达， 而且正常其他脏器均处于极低的表达水平。 基于目前的研究现状， CDH17有极大潜力 作为消化系统恶性肿瘤 及其转移瘤的治疗新靶点。 但是目前 未见针对CDH17的靶向抗体。 发明内容 [0004]针对以上技术问题， 本发明公开了一种靶向钙粘蛋白17的纳米抗体及其应用， 该 纳米抗体与钙粘蛋白17具有很好的结合活性和 较高的亲和力， 可以用于关于CDH17蛋白在 各种疾病中的成像和治疗产品中。 [0005]对此， 本发明采用的技 术方案为： [0006]一种靶向钙粘蛋白17的纳 米抗体， 所述靶向钙粘蛋白17的纳米抗体的氨基酸序列 的互补决定区为如SEQ  ID NO:2所示的CDR1、 如SEQ  ID NO:4所示的CDR2、 如SEQ  ID NO:6所说　明　书 1/6 页 3 CN 114044823 B 3