(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210391350.X (22)申请日 2021.11.12 (62)分案原申请数据 202111336612.4 2021.1 1.12 (71)申请人 深圳市人民医院 地址 518000 广东省深圳市罗湖区翠竹街 道东门北路1017号大院 (72)发明人 肖炜　王复婧　李志杰　王继刚　 孙继超　 (74)专利代理 机构 深圳壹舟知识产权代理事务 所(普通合伙) 44331 专利代理师 欧志明 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C12N 15/13(2006.01)C12N 15/70(2006.01) C12N 1/21(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 25/28(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 49/00(2006.01) A61K 49/04(2006.01) C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 靶向RAGE的纳米抗体及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种靶向RAGE的纳米抗体及 其应用， 所述靶向RAGE的纳米抗体的氨基酸序列 的互补决定区为如SEQ  ID NO:16所示的CDR1、 如 SEQ ID NO:18所示的CDR2、 如SEQ  ID NO:20所示 的CDR3。 本发明的技术方案的纳米抗体， 与RAGE 有较强结合， 可以阻断RAGE与各种受体的相互作 用， 对AD和癌症产生治 疗效果。 权利要求书1页 说明书5页 序列表9页 附图5页 CN 114716551 A 2022.07.08 CN 114716551 A 1.靶向RAGE的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向RAGE的纳米抗体的氨基酸序列的互补 决定区为如SEQ  ID NO:16所示的CDR1、 如SEQ  ID NO:18所示的CDR2、 如SEQ  ID NO:20所示 的CDR3。 2. 根据权利要求1所述的靶向RAGE的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向RAGE的纳米抗 体的氨基酸序列的框架区为SEQ  ID NO:15所示的FR1、 如SEQ  ID NO:17所示的FR2、 如SEQ   ID NO:19所示的FR3、 如SEQ  ID NO:21所示的FR4。 3. 根据权利要求2所述的靶向RAGE的纳米抗体， 其特征在于： 所述靶向RAGE的纳米抗 体的氨基酸序列如SEQ  ID NO:24所示。 4.一种核酸， 其特征在于， 所述核酸为： 编码权利要求1~3任意一项所述的靶向RAGE的 纳米抗体的核酸序列。 5.一种表达载体， 其包 含权利要求 4所述的核酸。 6.一种宿主细胞， 其包 含权利要求5所述的表达载体。 7.权利要求1~3任意一项所述的靶向RAGE的纳米抗体在制备靶向阿尔茨海默症和癌症 的RAGE的检测试剂、 靶向阿尔茨海默症和癌症的RAGE的药物、 活体成像探针、 嵌合型免疫细 胞治疗产品或治疗性双特异性 抗体中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114716551 A 2靶向RAGE 的纳米抗体及其应用 技术领域 [0001]本发明属于免疫学或分子生物学技术领域， 尤其涉及一种靶向RAGE的纳 米抗体及 其应用。 背景技术 [0002]RAGE （the  receptor  for advanced  glycation  end products） ， 中文名称为晚期 糖基化终末产物受体， 是糖化终产物 （advanc ed glycation  end products， AGEs） 的细胞表 面受体。 细胞和组织内的AGE s积累是衰 老的重要分子特征， 当细胞内蛋白存活 时间过长时， AGE蛋白修饰就会发生， 从而导致修饰后的蛋白相互交联失去功能。 AGE修饰是一个不可逆 的过程， 随着时间推移， AGEs积累增多， RAGE通路被激活， 并导致RAGE的表达不断升高。 除 AGE外， 疾病发生过程中的重要蛋白如阿尔茨海默症 （AD） 相关的Abeta蛋白和癌症相关的 HMGB1蛋白都被证实为RAGE的配体， 且这些配体 ‑受体信号通路对疾病预测和疾病发展关系 密切。 [0003]RAGE在AD疾病进展中主要在血液循环系统和中枢神经系统中发挥作用。 在血液循 环系统中， RAGE可作为Abeta受体促进其向大脑中的转运， 从而引起Abeta沉积； 在中枢神经 系统中， RAGE激活可以促进神经炎性反应、 Abeta生成增加、 和tau磷酸化加剧， 是AD病理改 变的关键调控因子。 在AD动物模 型和AD病人中， RAGE的表达水平都显著升高， 且有证据表明 RAGE表达量升高是先于Abeta  plaque发生的。 这些结果暗示了RAGE激活可能是衰老相关的 生理改变向AD病理改变的关键因素。 [0004]纳米抗体可通过靶向各种疾病重要靶点， 阻断或激活相应靶蛋白和信号通路， 从 而起到治疗作用， Caplacizumab是第一款经美国FDA批准的用于治疗血栓性血小板减少性 紫癜的纳米抗体 药物 （acquired  Thrombotic Thrombocytopenic  Purpura， aTPP） 。 此外， 纳 米抗体还可以作为靶向工具， 在体内帮助药物或者诊断分子定位到疾病相关靶蛋白， 其中 靶向肿瘤生物标记物 的纳米抗体被不断鉴定出来， 如  EGFR1或EGFR2 （或分别为  HER1 和  HER2） 、 VEGFR2、 c ‑Met 和 CXCR7等蛋白的纳米抗体已经被报道。 但到目前为止， 尚未见到靶 向RAGE的纳米抗体 被发现。 [0005]此外， 在恶性肿瘤 （包括肾癌、 前列腺癌、 胃癌、 乳腺癌和结肠癌等） 中， RAGE的表达 水平显著升高， 这一现象被证实与癌症的转移和不良预后相关， 因此RAGE也可以作为癌症 诊断标志物， 将RAGE纳米抗体与具有成像效果的纳米材料结合， 具有癌症成像诊断的应用 价值。 肿瘤发展过程中高表达的HMGB1被证实通过结合RAGE受体激活p38  MAPK， p42/p44， 以 及JNK等信号通路， 进而激活纤维蛋白溶解酶， 使得癌细胞更易发生迁徙和转移。 癌细胞中 AGE‑RAGE信号通路还影响了细胞凋亡、 坏死和自噬， 通过抑制RAGE受体的激活， 可以增加细 胞凋亡， 并减少癌细胞抗药性的产生。 因此， 基于RAGE纳米抗体的靶向性药物 也具有癌症临 床治疗的应用价 值。说　明　书 1/5 页 3 CN 114716551 A 3