(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111330226.4 (22)申请日 2021.11.11 (71)申请人 沈阳药科大学 地址 117004 辽宁省本溪市高新 技术产业 开发区华佗大街26号 (72)发明人 宋少江　黄肖霄　米斯会　 (74)专利代理 机构 沈阳东大知识产权代理有限 公司 21109 代理人 李珉 (51)Int.Cl. C07D 303/17(2006.01) C07D 301/32(2006.01) C07D 493/10(2006.01) A61K 31/336(2006.01) A61K 31/352(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备 和应用 (57)摘要 芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备 和应用， 属于医药技术领域， 具体涉及从瑞香科 瑞香属植物芫花花蕾中提取分离的两个新瑞香 烷型二萜类化合物yuanhuakine  A,D。 本发明所 述化合物是采用硅胶、 HP20柱层析、 ODS柱层析、 HPLC等色谱方法得到的。 本发明还涉及化合物1 ‑ 2在制备抗肿瘤细胞活性药物中的应用。 本发明 制备方法简单， 重现性好， 所得化合物纯度高， 获 得的化合物具有较好的A549,Hep3B,和MCF ‑7细 胞系的肿瘤细胞抑制活性。 权利要求书2页 说明书7页 附图16页 CN 114031579 A 2022.02.11 CN 114031579 A 1.一种芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物， 其特征在于， 所述瑞香烷型二萜类化合物 结构如下： 2.根据权利要求1所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物， 其特征在于， 所述的瑞香 烷型二萜类化 合物是从瑞香科瑞香属植物芫花 花蕾中提取分离得到 。 3.一种权利要求1或2所述芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法， 其特征在 于， 包括如下步骤： (1)取干燥的芫花花蕾以工业乙醇回流提取， 合并提取液浓缩得到浸膏， 所得浸膏先后 采用二氯甲烷， 乙酸乙酯萃取， 萃取液浓缩后经硅胶柱色谱， 以二氯甲烷 ‑甲醇系统进行梯 度洗脱， 共收集到4个馏分(Fr.A ～Fr.D)； (2)馏分Fr.C经HP20柱色谱分离， 以乙醇水梯度洗脱， 收集得到4个馏分(Fr.C ‑1～ Fr.C‑4)； (3)馏分Fr.C ‑1,Fr.C‑2,Fr.C‑3,Fr.C‑4经ODS柱分离， 交叉合并， 以乙醇水梯度洗脱， 收集得到新的4个馏分(Fr.C ‑I， Fr.C‑II， Fr.C‑III， Fr.C‑IV)； (4)馏分Fr.C ‑II和Fr.C ‑IV分别经硅胶柱， 经石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱； 其中馏分 Fr.C‑II洗脱得到 的馏分Fr.C ‑II‑3经制备型HPLC， 以甲醇/水洗脱， 得到10个馏分(Fr.C ‑ II‑3‑1～Fr.C‑II‑3‑10)， 其中馏分Fr.C ‑II‑3‑4再经过半制备型HPLC色谱， 以乙腈/水洗 脱， 分离纯化得到化合物1； 馏分Fr.C ‑IV洗脱得到的馏分Fr.C ‑IV‑4经制备型HPLC， 以甲醇/ 水洗脱， 得到14个馏分(Fr.C ‑IV‑4‑1～Fr.C‑IV‑4‑14)， 馏分Fr.C ‑IV‑4‑10再经过半制备型 HPLC色谱， 以乙腈/水洗脱， 分离纯化得到化 合物2。 4.根据权利要求3所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中二氯甲烷 ‑甲醇的梯度为： 10 0:1～1:1。 5.根据权利要求3所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(2)中乙醇水的梯度洗脱浓度为： 20％,40％,6 0％,90％。 6.根据权利要求3所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(3)中乙醇水的梯度洗脱浓度为： 20％,40％,6 0％,80％,90％。 7.根据权利要求3所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中石油醚/乙酸乙酯的梯度为100:1～1:2， 制备液相甲醇/水的比例为85:15， 半制备液相乙腈/水的比例为70:3 0。 8.一种药物组合物， 其特征在于， 包含权利要求1或2所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜 类化合物和药 学上可接受的载体或赋 形剂。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114031579 A 29.一种权利要求1或2所述的芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物或权利要求8所述的药 物组合物的应用， 其特 征在于， 在制备抗肿瘤 细胞活性药物中应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤细胞包括A549,Hep3B,和MCF ‑7 细胞系的肿瘤 细胞。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114031579 A 3