(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111395020.X (22)申请日 2021.11.23 (71)申请人 福建师范大学 地址 350117 福建省福州市闽侯县上街 镇 学府南路8号福建师 范大学旗山校区 (72)发明人 欧阳松应 　苏经迁　陈由强　 刘智禹　苏永昌　萧建斌　 (74)专利代理 机构 福州科扬专利事务所(普通 合伙) 35001 代理人 郭梦羽 (51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) A61K 36/481(2006.01) A61K 31/715(2006.01) A61K 9/48(2006.01)A61K 47/36(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/04(2006.01) (54)发明名称 一种鲍鱼多糖的制备方法及应用 (57)摘要 本发明公开一种鲍鱼多糖的制备方法， 具体 包括如下步骤： 预处理： 利用冻干粉碎方法处理 鲍鱼内脏， 得到鲍鱼内脏粉； 一次酶解： 采用综合 酶处理鲍鱼内脏粉， 得到酶解液； 所述综合酶包 括碱性蛋白酶、 中性蛋白酶、 风味蛋白酶、 木瓜蛋 白酶和胰蛋白； 超滤： 超 滤鲍鱼内脏酶解液， 将酶 解液过截留分子量30kDa的超滤膜， 透过液再过 10kDa超滤膜； 经过一次酶解和超滤过程后获得 的多糖样品再次进行二次酶解和超 滤， 获得鲍鱼 内脏粗多糖； 经过上述步骤制得的鲍内脏粗多糖 CAVP通过阴离子交换和Sephacryl  S‑300HR柱层 析柱进行 纯化分离， 制得最终鲍鱼多糖 。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 114133459 A 2022.03.04 CN 114133459 A 1.一种鲍鱼多糖的制备 方法， 其特 征在于， 具体包括如下步骤： (1)预处理： 利用冻干粉碎方法处 理鲍鱼内脏， 得到鲍鱼内脏粉； (2)一次酶解： 采用综合酶处理鲍鱼内脏粉， 得到酶解液； 所述综合酶包括碱性蛋白酶、 中性蛋白酶、 风味蛋白酶、 木瓜蛋白酶和胰蛋白； (3)超滤： 超滤鲍鱼内脏酶解液， 将酶解液过截留分子量30kDa的超滤膜， 透过液再过 10kDa超滤膜； (4)经过一次酶解和超滤过程后获得的多糖样品再次进行二次酶解和超滤， 获得鲍鱼 内脏粗多糖； (5)经过上述步骤制得的鲍内脏粗多糖CAVP通过阴离子交换和SephacrylS ‑300HR柱层 析柱进行 纯化分离， 制得最终鲍鱼多糖。 2.如权利要求1所述的一种鲍鱼多糖的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(1)中鲍鱼内 脏粉与综合酶解液的料 液比1:20～1:6 0； 加酶量 为1000～5000U/g。 3.如权利要求1所述的一种鲍鱼多糖的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(2)中一次酶 解的温度为5 0～60℃， pH为9.0～ 9.5， 酶解时间为15～19h 。 4.如权利要求1所述的一种鲍鱼多糖的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(4)中二次酶 解采用风味蛋白酶， 酶解的温度为5 0～60℃， pH为8.0～ 9.0， 酶解时间为10～15 h。 5.一种根据上述权利要求1至4任一所述方法制备得到的鲍鱼多糖应用 在制备鲍鱼多 糖胶囊中。 6.如权利要求5所述的一种鲍鱼多糖在制备鲍 鱼多糖胶囊中的应用， 其特征在于， 所述 鲍鱼多糖胶囊 具体包括如下重量份的原料： 鲍鱼多糖、 100 ‑150份， 黄芪提取物、 100 ‑120份， 西洋参提取物、 25 ‑33.3份， 玉米淀粉、 80 ‑92.7份和硬脂酸镁、 2 ‑4份。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114133459 A 2一种鲍鱼多糖的制备方 法及应用 技术领域 [0001]本发明属于生物制品技 术领域， 具体涉及一种鲍鱼多糖的制备 方法及应用。 背景技术 [0002]近几年来， 随着分子生物学的发展， 人们逐渐认识到多糖、 蛋白质与 核酸一样是涉 及生命活动本质的三类生物大分子之一。 多糖作为重要的生物活性物质， 不仅是人体生命 必需的成分， 而且存在于一切细胞膜结构中， 并参与了细胞的各种生命现象的调节， 可作为 免疫促进剂， 能控制细胞的分裂和分化， 调节细胞的生长和衰老， 对肿瘤细胞起抑制作用， 同时对正常细胞 无毒害作用。 [0003]鲍鱼又名鳆、 鳆鱼， 是单壳软体且具有很高营养价值的海洋贝类， 鲍鱼生长期长， 在海洋的高盐、 高压、 低 温这种特殊环境中生活， 身体中富集了大量生理活性物质， 有研究 从鲍鱼中分离和纯化出能够高效抑制鼻咽癌细胞的纯多糖， 现有研究也显示鲍鱼多糖具有 很好的抗肿瘤活性和增强机体免疫功能。 申请号为CN200510047409.X的中国专利公开了 “鲍鱼多糖的提取方法 ”， 其中， 具体公开了将鲍鱼去壳取肉， 用组织捣碎机破壁， 加水浸提， 离心分离后浓缩提取液， 在利用乙醇实现醇沉， 离心后真空法或喷雾法干燥得产品， 在提取 过程中用加碱提取、 超声波提取、 酶提取， 酶提取可以用单一酶、 双酶、 复合酶、 自溶酶和复 合法提取 的方法， 该本发明开创了从鲍鱼提取鲍鱼多糖的工艺路线， 有效地将鲍鱼多糖提 取出来， 但是利用复合酶、 超声等方法提取， 多糖得率较低； 申请号为CN201110123164.X的 中国专利公开了 “鲍鱼多糖的制备工艺 ”， 具体公开了在常温下进 行高压脉冲电场处理鲍鱼 预处理液， 再利用壳聚糖进 行絮凝提高多糖纯度， 并利用电渗析进 行处理脱去重金属， 最后 用醇沉制得鲍鱼多糖的方法， 该方法在保证所得多糖的生物活性的同时， 解决了传统酶法 提取工艺多糖得率低的难题； 但是制备过程中采用高压脉冲电场进行提取需要使用大量的 有机溶剂， 且得率低、 不 易操作、 危险性大、 对设备要求苛刻， 无法实现产业 化生产。 发明内容 [0004]为克服现有技术中存在的问题， 本发明提供及一种鲍鱼多糖的制 备方法， 通过分 别的二次酶解和超滤 的结合对冻干粉碎处理的鲍内脏粉进行处理， 提取鲍鱼多糖， 在简化 工艺的同时能够提高传统酶解的多糖提取率。 [0005]本发明的技 术方案如下： [0006]本发明公开了一种鲍鱼多糖的制备 方法， 具体包括如下步骤： [0007](1)预处理： 利用冻干粉碎方法处 理鲍鱼内脏， 得到鲍鱼内脏粉； [0008](2)一次酶解： 采用综合酶处理鲍鱼内脏粉， 得到酶解液； 所述综合酶包括碱性蛋 白酶、 中性蛋白酶、 风味蛋白酶、 木瓜蛋白酶和胰蛋白； [0009](3)超滤： 超滤鲍鱼 内脏酶解液， 将酶解液过截留分子量30kDa的超滤膜， 透过液再 过10kDa超滤膜； [0010](4)经过一次酶解和超滤过程后获得的多糖样品再次进行二次酶解和超滤， 获得说　明　书 1/5 页 3 CN 114133459 A 3